第312章 陈师弟牛逼(2/2)
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/>有师弟双眼精光爆闪，“那我们岂不是赶上好时候了。”
他们进行这个研究已经三年了，自然知道它的价值，如果真能证实他们的猜想，这个成果必然是世界级的，以后他们将成为这个领域的绝对权威。
“先别做梦了，看看验证结果再说吧……”
“好了，模型的仿真结果大家都已经看到了，接下来我们需要使用Western Blot技术进行靶点确认。”
宋朝明站在会议室最前方，拍了拍手，等到会议室安静下来，才开口说道。
他们需要重复陈辉模型中最关键的起点，确认在他们的特定EGFR突变细胞系中，PKCδ的磷酸化水平确实在用药后异常升高，且时间点与预测吻合。
这是一切的基础，只有完成了靶点确认，他们才能进行下一步实验。
很快，宋朝明安排好实验分工，众人一哄而散，穿上实验服进入实验室，虽然心中依旧有些迟疑，但他们也迫不及待的想看到最后的验证结果。
可惜生物实验与其他实验还有一些不同，它需要时间的沉淀，无法速成。
实验紧张而有序地展开，培养箱日夜运行，实验室的灯常常亮到深夜。
直到三天后，Western Blot结果才出来，
当那张暗房里显影的胶片被拿出来时，负责的实验员几乎是小跑着拿去给宋朝明。
结果清晰无比，在用药后1小时和6小时，PKCδ的磷酸化条带果然比对照组明显更浓！模型的第一步预测被完美证实！
实验室里响起一阵小小的欢呼，所有人看向陈辉的眼神都变了，有因为之前怀疑的愧疚，也有因为陈辉惊人实力而产生的狂热崇拜。
“陈师弟牛逼！”
不知道哪位师弟忽然激动的大喊了一声。
“陈师弟牛逼！”
很快，这样的欢呼就充满了实验室。
宋朝明脸上也露出了欣慰的笑容，他这所重点实验室，已经很久没有经历过如此热烈的欢呼了。
“好了，这只是第1步，最关键的还在后面呢。”
等了几分钟，等到大家将兴奋的情绪宣泄以后，宋朝明才再次开口说道。
接下来他们需要进行功能获得/丧失实验，首先，他们需要设计并合成针对PKCδ基因的siRNA，转染进癌细胞，特异性沉默PKCδ的表达。
使用一种已知的、较为特异的PKCδ抑制剂比如Rottlerin或其类似物，在不同浓度下处理细胞。
使用CCK-8或MTT等assays，分别检测在仅用靶向药、仅抑制PKCδ、以及两者联用的情况下，癌细胞的增殖活力变化。
根据陈辉的模型预测，联用组应表现出显著的协同抑制效应。
接下来就需要进行长期观察，观察在长期作用下，癌细胞形成集落的能力是否被联用方案彻底摧毁。
在施加上述处理后，再次利用Western Blot或磷酸化抗体芯片，检测陈辉预测的通路下游关键蛋白CRAF， MEK， ERK的磷酸化水平。
根据模型预测，抑制PKCδ后，下游这些蛋白的磷酸化水平应显著降低，证明通路被成功阻断。
很快，宋朝明就带领团队制定了后续的验证计划。
所有人都斗志昂扬的投入到了接下来的验证实验中。
第二天，siRNA转染完成，抑制剂也已加样，细胞在各自的处理条件下继续培养，所有人都小心翼翼的关注着那些培养板，仿佛里面正在孕育着决定命运的答案。
第五天，细胞活力检测的结果率先出炉，唐剑将数据处理成图表，打印出来时，手都有些颤抖。
图表显示单独使用奥希替尼靶向药，细胞活力有所下降，但远未死亡，证实了耐药。
单独使用PKCδ抑制剂，细胞活力仅有轻微影响。
但两者联用，细胞活力出现了断崖式下跌！
抑制率远超两者单独效果之和，出现了强烈的协同效应！
“成功了！老师！你看！”唐剑激动地指着图表，宋朝明一把抓过图纸，眼睛死死盯着那条代表联用的曲线，脸上因激动而泛红，喃喃道：“对上了…完全对上了！”
陈辉也松了口气，事实证明，他是对的！
随后几天的结果接踵而至，每一步都严丝合缝地印证着陈辉的预测，对照组和单药组还能形成大小不一的细胞集落，而联用组的培养板上几乎光洁如新，意味着癌细胞的增殖潜能被彻底根除。
最后进行机制回溯Western Blot，结果显示，在抑制了PKCδ后，下游的p-CRAF、p-MEK、p-ERK的信号强度果然如同被关掉了闸门一样，显著减弱甚至消失。
这条非经典通路的信号流被清晰地可视化了出来，从源头到下游，被彻底切断。
宋朝明拿着所有的实验数据报告，那份完美无缺的验证报告，站在实验室中央，他的手因为激动而微微颤抖，他环视着同样激动不已、如释重负的团队成员们。
“我们……我们成功了！”他的声音一开始有些哽咽，随即变得洪亮而充满力量，“五个月！卡了我们五个月的难题，解决了！不仅解决了，我们还发现了一条全新的、重要的耐药机制！”
他挥舞着手中的数据图，“陈飞的模型，100%正确！从靶点、到时序、到功能、到机制，每一步都预测得精准无比！这不是运气，这是……这是真正的实力！”
实验室里爆发出前所未有的欢呼和掌声，夹杂着这几年来积压的压力彻底释放的感叹声，有人甚至激动地跳了起来，在实验室手舞足蹈，激动得不能自已。
宋朝明立刻拿出手机，走到窗边，第一个电话打给了刘教授，几乎是喊着说：“老刘！你介绍来的那个陈辉……是个天才！绝对的！他解决了！完美解决！”
刘吉守也有些激动，他没想到陈辉竟然这么快就解决了宋朝明的问题，当然，这还是因为他并没有完全明白宋朝明这个成果的重要性。
第二个电话，宋朝明毫不犹豫地打给了陈辉本人。
“陈飞！”他的语气充满了难以抑制的兴奋和敬佩，“验证结果出来了……完美！所有的预测，全部吻合！你帮我们打开了一扇全新的大门！”
电话那头，陈辉的声音依然平静，只是简单地回道，“那就好，宋教授，数据发我一份，这对我的模型优化很有帮助。”
完整了解了宋朝明的思路之后，陈辉就知道这个成果只能算是肿瘤研究的一个进步，并不能完全解决癌症。
因为这样的非经典通路，很难穷举，每一个癌症患者的症状都并不完全相同，很可能，一千个肺癌，有一千个经典通路。
这只是一小步而已，并不值得狂喜。
宋朝明放下电话，看着窗外，心中波澜起伏。
他明白，他见证的不仅仅是一个技术难题的解决，更是一种全新的、强大的科研范式的降临，而这个带来变革的人，竟然是一个如此年轻的外援。
陈辉的名字，从这一刻起，在他的心中拥有了沉甸甸的分量。